近20年來,免疫組織化學(xué)在病理學(xué)診斷領(lǐng)域的研究和應(yīng)用越來越廣泛,甚至已經(jīng)成為了病理診斷尤其是腫瘤的鑒別診斷中不可缺少的較重要的輔助手段,使病理學(xué)診斷達(dá)到了一個(gè)新的高度,也為檢測(cè)腫瘤組織的相關(guān)抗原以及指導(dǎo)臨床治療和預(yù)后提供了重要依據(jù)。然而,免疫組化是一種多步驟、多因素決定的科學(xué)實(shí)驗(yàn)方法,存在很多干擾因素,影響染色結(jié)果,甚至可能導(dǎo)致誤判或誤診。那免疫組化注意事項(xiàng)有哪些呢?不孕不育專家將其總結(jié)為一下幾點(diǎn)。
免疫組化注意事項(xiàng)
1、為達(dá)到免疫組織化學(xué)的要求,組織固定越新鮮越好。
2、組織脫水必須干凈。
3、切片必須完整、均勻、平展、無鄒折。
4、切片的附貼必須牢固,必須使用合適的粘貼劑。
5、切片必須烘烤附貼牢固,既要經(jīng)得起抗原修復(fù)時(shí)高溫的作用而不使輕易脫片,又不至于破壞抗原。
6、切片脫蠟必須干凈,否則將會(huì)影響免疫組化染色的最終結(jié)果。
7、必須抑制內(nèi)源性過氧化物酶的活性,才能降低背景的染色。
8、須適當(dāng)合理地使用封閉試劑。
9、選擇合適的抗體。
10、連接抗體的選用必須,否則可造成假陰性的現(xiàn)象。
11、復(fù)合物的使用及孵育時(shí)間的確定。
12、PBS的沖洗。
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